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SPE固相萃取的技術原理及操作步驟
雙擊自動滾屏 發布者:鄭州寶晶電子科技有限公司 發布時間:2025/2/11 閱讀:4790

鄭州寶晶電子科技有限公司SPE固相萃取技術的介紹說明

一. 固相萃取概念及基本原理:
   
固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱
SPE)是一項樣品前處理技術。由液固萃取和液相色譜技術相結合發展而來。主要通過固相填料對樣品組分的選擇性吸附及解吸過程,實現對樣品的分離,純化和富集。主要目的在于降低樣品基質干擾,提高檢測靈敏度。
   
固相萃取
的基本原理和方法:
    SPE技術基于液-固相色譜理論,采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進行富集、分離、純化,是一種包括液相和固相的物理萃取過程;也可以將其近似的看作一種簡單的色譜過程。
   
固相萃取SPE)是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品通過一吸附劑,保留其中被測物質,再選用適當強度溶劑沖去雜質,然后用少量溶劑洗脫被測物質,從而達到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質,而讓被測物質流出;或同時吸附雜質和被測物質,再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質。
二.
固相萃取方法的優點
    相對于傳統的液液萃取法和蛋白沉淀法,
固相萃取具有無可比擬的優勢:
    凈化方法:LLE(液液萃取)
    優 點:無需特殊裝置和材料
    缺 點:

    1.操作繁瑣,費時
    2.需要耗費大量的有機溶劑,導致高成本和對環境的污染
    3.難以從水中提取高水溶性物質   
    凈化方法:PPT(蛋白沉淀)
    優 點:操作簡單,無需特殊裝置
    缺 點:

    1.非特異性的沉淀反應可能使微量的分析物隨著基質蛋白質共同沉淀而損失
    2.凈化效果較弱,檢測靈敏度和可靠性低   
    凈化方法:SPE(
固相萃取
    優 點:

    1.集樣品富集及凈化與一身,提高檢測靈敏度的方法
    2.比液液萃取快,節省溶劑
    3.可自動化批量處理
    4.重現性好
    缺 點:

    1.使用進口固相萃取小柱的成本較高
    2.需要人員協助方法開發  
三.
固相萃取裝置及基本操作步驟
    1.
固相萃取柱
    (1)SPE小柱
    關于
固相萃取小柱
    a.常見的固相萃取柱分為三部分:醫用聚丙烯柱管,多孔聚丙烯篩板(20μm)和填料(多為40-60μm,80-100μm)
    b.常見規格:100mg/1ml,200mg/3ml,500mg/3ml,1g/6ml等。以100mg/1ml為例,其中100 mg
    為填料的質量,1ml是空柱管的體積。
    c.一次性使用:為避免交叉污染,保證檢測可靠性,
SPE小柱通常是一次性使用的。
    2)96孔板
    96孔板是高通量的SPE產品,每孔含少量吸附劑(10-100mg),樣品載量約2ml/孔主要用于生物,醫藥等行業小量的多樣品的凈化處理。且多與自動化的樣品處理處理裝置連用(如Tomtec液體處理工作站)。其基本原理和使用方法與SPE柱相似。
    2.
固相萃取裝置 (YGC-8數控自動固相萃取儀 YGC-6圓形固相萃取儀 YGC-6A方缸一體式固相萃取儀 YGC-6B固相萃取儀  YGC-8自動固相萃取儀
    (1)真空SPE裝置(SPE Vacuum Manifolds)組成:玻璃缸,真空壓力表,
真空泵,真空緩沖瓶,收集管架,小柱連接頭,大體積取樣器,12位或24位防交叉污染裝置。
    標配StopCock閥,精確控制流速
    試管架高度可調,滿足不同體積需要
    壓力表放空閥側面設計,使用方便
    設計緊湊、經久耐用、性價比高
    2)
自動化固相萃取裝置
    a.醫藥/環保/刑事鑒定中自動樣品前處理
    b.自動進行固相萃取/可多組份收集
    c.無人為影響,無乳化,節省溶劑
    d.高回收率,高重現性,高效率適用于各種商品萃取柱
    e.自動記錄資料,便于GLP管理
    f.特別適合于HPLC或LC/MS的樣品處理
    g.價格較高
    3.基本操作步驟
    針對填料保留機理的不同(填料保留目標化合物或保留雜質),操作稍有不同。
    1)填料保留目標化合物
    固相萃取操作一般有四步:
    活化——除去柱子內的雜質并創造一定的溶劑環境。
    上樣——將樣品用一定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分保留在柱上。
    淋洗——較大程度除去干擾物。
    洗脫——用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集。
    2)填料保留雜質
    固相萃取操作一般有三步:
    活化——除去柱子內的雜質并創造一定的溶劑環境。
    上樣——將樣品轉移入柱,此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出,雜質被保留在柱上。故此步驟要開始收集。
    洗脫——用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集。合并收集液。
    此種情況多用于食品或農殘分析中去除色素。

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